Karboksylowy koniec kinezyny-14 Ncd jest kluczowym elementem mechanizmu generacji siły

Ncd jest kinezyną biorącą udział w tworzeniu i organizacji wrzeciona podziałowego. Sugerowano, że sąsiadujący z główką, karboksylowy koniec tego motoru, obejmujący 30 ostatnich aminokwasów, może pełnić ważną rolę w procesie generacji ruchu jako tzw. łącznik szyjki. Aby poznać funkcję tego fragmentu Ncd, skonstruowaliśmy cztery mutanty, w których ten odcinek był usunięty lub zmieniony. Mutant Ncd pozbawiony C-końca znacznie słabiej wiązał mikrotubule, wolniej je przesuwał w teście ruchliwości in vitro i wolniej hydrolizował ATP. Wykazaliśmy, że 9-aminokwasowy, bogaty w reszty zasadowe fragment badanego regionu wystarczał do osiągnięcia wysokiego powinowactwa do mikrotubul i szybkiej hydrolizy ATP. Jednak do wydajnej generacji ruchu potrzebne były również pozostałe aminokwasy. Powyższe wyniki potwierdzają hipotezę, że mechanizm generacji ruchu przez Ncd jest podobny jest do tego, który występuje w kinezynie-1. W obu typach kinezyn generacja ruchu odbywa się dzięki kontrolowanym przez hydrolizę nukleotydu tworzeniu i zrywaniu wiązań pomiędzy główką a szyjką.

Data publikacji
23 kwietnia 2012